本生知識點—ELISA樣本分析及實驗原理

　　elisa試劑盒實驗原理：

　　試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中產(chǎn)品水平。用純化的其抗體包被微孔板，制成固相抗體。往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品，再與HRP標記的其抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中產(chǎn)品的濃度。

　　elisa試劑盒種屬：人，大鼠，小鼠，雞，鴨，魚，貓，馬，豬，兔，倉鼠，豚鼠，裸鼠，植物等elisa試劑盒。

　　ELISA樣本分析：

　　1.回溫平衡：

　　在加樣之前約半小時左右，把試劑盒從冰箱中取出，放置在室溫下進行平衡，平衡到用手握住試劑瓶感覺到不涼為止。如果時間匆忙的話也可以利用手握住試劑瓶進行快速回溫。

　　2.反應時間：

　　盡量把時間控制在需要的反應時間，如果時間比較緊迫的話也可以把時間稍微延長幾分鐘，但不宜太長。顯色時間可根據(jù)顏色深淺進行調(diào)整。

　　3.加樣：

　　取出相應數(shù)量的微孔板放置在板架上，然后再對板孔進行編號，再對需要稀釋的抗體或酶標記物進行稀釋。在板孔的前六個孔內(nèi)分別加入標準品1-6，然后在剩下的板孔內(nèi)加入樣品分析液。然后再在每孔內(nèi)加入其余需要加入的液體。蓋上蓋板膜以后小幅度振蕩，然后放置在相應的環(huán)境中進行反應。如是25℃環(huán)境反應，則可放置在空調(diào)房內(nèi)進行反應;如果是37℃環(huán)境下反應，則必須放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱里進行反應，如果是4℃環(huán)境下反應，則必須放置在2-8度冰箱里進行培養(yǎng)。

　　4.洗板：

　　把板內(nèi)液體甩干，加入稀釋好的洗液250ul/孔，靜置10s或稍作振蕩后甩掉孔內(nèi)液體，再次加入洗液，以此重復3-4遍，洗完以后利用吸水紙把孔內(nèi)液體充分拍干后進行下一步操作，如果孔內(nèi)有氣泡，則利用干凈的槍頭刺破。

　　5 結(jié)束實驗:

　　把加樣槍全部調(diào)到zui大量程,試劑盒放入冰箱,試管及離心管進行清洗,關閉不用的儀器.

　　ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。